常見細(xì)胞流體剪切力實驗類型及特征簡要介紹
koster / 2018-11-09
常見細(xì)胞流體剪切力實驗類型及特征簡要介紹
廣州科適特科學(xué)儀器有限公司
-用這個的話,基質(zhì)膠要稀釋嗎程昨?以了哀擒。
一. 流體剪切力細(xì)胞實驗背景
液體是每個生物物種的重要組成部分。在生理狀態(tài)下鳄盗,許多細(xì)胞類型被流體環(huán)境包圍扫觅。典型例子包括:血管內(nèi)皮細(xì)胞,形成血管內(nèi)層送写,淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞硅枷,形成淋巴管內(nèi)層,腎和肺的上皮細(xì)胞粱祟。
這種液體流動引起剪切應(yīng)力浙鞋,這是一種機(jī)械力,以多種方式影響細(xì)胞形態(tài)和行為持偏。在許多標(biāo)準(zhǔn)體外實驗中驼卖,細(xì)胞在沒有流動的情況下培養(yǎng)。在這些靜態(tài)條件下鸿秆,通常沒有考慮剪切應(yīng)力依賴性細(xì)胞變化酌畜。實際上,在流動下的體外細(xì)胞培養(yǎng)并模擬這種機(jī)械刺激并誘導(dǎo)更加接近生理狀態(tài)的體內(nèi)生物過程行為很有意義卿叽。特別對于研究在生物流體中存在的細(xì)胞時桥胞,模擬流動狀態(tài)顯得尤其重要,如內(nèi)皮細(xì)胞或上皮細(xì)胞考婴。
下圖實驗顯示了靜態(tài)和流動狀態(tài)下人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的免疫熒光圖像贩虾,顯示在流體環(huán)境和靜止環(huán)境下細(xì)胞的不同狀態(tài)。 用鬼筆環(huán)肽(紅色)染色細(xì)胞骨架F-肌動蛋白沥阱。 VE-鈣粘蛋白(綠色)標(biāo)記粘附連接點缎罢。 使用DAPI(藍(lán)色)染色細(xì)胞核。
左:HUVEC考杉,靜態(tài)培養(yǎng)策精,0 dyn / cm, 2.5天崇棠, μ-slide 35mm培養(yǎng)皿求旷。 右:HUVEC,流體剪切力10 dyn /cm2環(huán)境燎匪,2天赊手,μ-Slide I 0.4 Luer.
二.流動剪切應(yīng)力對細(xì)胞的影響
剪切應(yīng)力是由液體對頂端細(xì)胞膜的摩擦引起的機(jī)械力。 在體內(nèi)购畴,幾種貼壁細(xì)胞類型暴露于生物流體系統(tǒng)中的機(jī)械剪切應(yīng)力冯爷,例如血液和淋巴管或腎單位。 這種機(jī)械刺激對細(xì)胞的生理行為和粘附特性有很大影響。 細(xì)胞通過離子通道激活昆畜,基因表達(dá)和整個細(xì)胞層的重組的變化對剪切應(yīng)力起反應(yīng)胃症。
上圖顯示了HUVEC在流動條件下(20 dyn /cm2)培養(yǎng) μ-SlideI 0.4 Luer 超過9天。 為了觀察細(xì)胞骨架向瓶,用腺病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞RAV巨細(xì)胞病毒-LifeAct-TagRFP 實驗前24小時肢椅。
剪切應(yīng)力以達(dá)因/平方厘米(dyn / cm 2)測量, 生理剪切應(yīng)力值的范圍為0.5至120達(dá)因/平方厘米,取決于血管類型(例如脱每,動脈或靜脈)害唧,組織(例如,腦忽孽,結(jié)締組織或心臟)绑改,以及生物體的大小(例如兄一,小鼠厘线,大鼠或人)。
下圖顯示了常見組織細(xì)胞的剪切力范圍:
組織類型
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剪切應(yīng)力(dyn /cm2)
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主動脈
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~ 1–22
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動脈
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~ 10–70
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靜脈
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~ 1–6
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毛細(xì)血管
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~ 3–95
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三.不同類型的流動簡要介紹
在不同的生物組織中出革,通常具有幾種明確特征的幾種流體類型造壮。 基本上,流動類型可以細(xì)分為層流和湍流:
下面是我們整理的幾種常見類型流體情況及特征骂束;
流動類型
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生理發(fā)生
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流量
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流動的方向
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使用ibidi泵/載玻片生成
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層流
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在許多健康的血管中常見
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是
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單向?qū)恿?/span>
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在大多數(shù)小型健康生物血管中
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不變
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不變
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是
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脈動層流
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在大動脈血管中由于心跳引起的波動
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定期更改
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不變
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是
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振蕩層流
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接受作為使用流動室的湍流模擬的手段
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不變
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定期更改
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是
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湍流
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罕見耳璧,在病理生理過程中
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更改
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更改
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沒有
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1 . 層流類型
層流被定義為沒有湍流的液體運動。 流體以平行層流動展箱,它們之間沒有中斷旨枯。 層流可以細(xì)分為以下幾種:
?單向?qū)恿?/span>
?脈動層流
?振蕩層流
2 .單向?qū)恿?/span>
在大多數(shù)小的健康生物血管中遇到單向?qū)恿鳎缧用}和靜脈混驰。 在體內(nèi)攀隔,某些細(xì)胞,例如內(nèi)皮細(xì)胞和腎上皮細(xì)胞诱紫,經(jīng)常暴露于流動二焰。
在實驗上纹站,通過在低壁通道中灌注介質(zhì)澈越,并通過保持流動方向和速度隨時間恒定來實現(xiàn)單向?qū)恿鳌?br />
3 .非均勻?qū)恿?/span>
單向?qū)恿骺梢砸圆痪鶆虻膱D案發(fā)生。 這里泌位,流動方向是恒定的晨瀑,而流速在細(xì)胞層上空間變化。 在體內(nèi)酒妄,在血管分支部位發(fā)生不均勻的層流拉冯。 在實驗上,非均勻?qū)恿骷羟袘?yīng)力可以通過特殊的通道幾何形狀來實現(xiàn),其在載玻片內(nèi)的特定位置處產(chǎn)生流速變化极胸。微型μ-Slide Y形載玻片兵蟹,已被設(shè)計用于研究非均勻流動的使用 ibidi泵系統(tǒng) 。 剪切應(yīng)力水平取決于Y-形玻片的不同區(qū)域眯穴。
4 .脈動層流
由于心跳引起的波動笆抱,在大動脈血管中遇到脈動層流。 實驗上砾脑,這種類型的流動可以通過采用具有周期性變化的流速和恒定流動方向的流動來模擬幼驶。
5 .振蕩層流
振蕩層流用作模擬湍流的手段。 流動方向以固定間隔改變韧衣。 除了閥門切換時盅藻,流量也是恒定的。
6 . 湍流
湍流的特征在于流速和方向隨時間的不可預(yù)測的變化畅铭。 在體內(nèi)氏淑,湍流很少見,只能在病理生理過程中發(fā)現(xiàn)顶瞒。
四.?dāng)?shù)據(jù)來源及參考文獻(xiàn)
1. C.P. Cheng, R.J. Herfkens, C.A. Taylor. Comparison of abdominal aortic hemodynamics between men and women at rest and during lower limb exercise. J Vasc Surg, 2003, 10.1067/mva.2002.107
2. C.P. Cheng, R.J. Herfkens, C.A. Taylor. Abdominal aortic hemodynamic conditions in healthy subjects aged 50-70 at rest and during lower limb exercise: in vivo quantification using MRI. Atherosclerosis, 2003, 168(2):323–31
3. A.M. Malek, S.L. Alper, S. Izumo. Hemodynamic shear stress and its role in atherosclerosis. JAMA, 1999, 282(21):2035–42
4.A.G. Koutsiaris, et al. Volume flow and wall shear stress quantification in the human conjunctival capillaries and post-capillary venules in vivo. Biorheology, 2007, 44(5–6):375–86