I型膠原蛋白是細胞外基質(zhì)(ECM)的主要結(jié)構(gòu)成分亡资。因此,這種纖維蛋白通常用于三維(3D)膠原凝膠怜跑,其比傳統(tǒng)的2D系統(tǒng)更好地模擬體內(nèi)細胞環(huán)境样勃。此外,膠原蛋白I是涂層表面的理想選擇性芬,因為它可以形成用于培養(yǎng)細胞的薄層峡眶。ibidi的I型膠原蛋白是一種從鼠尾肌腱中提取的最先進的純化蛋白,沒有胃蛋白酶消化。它專為ibidi基于細胞的分析而設(shè)計(例如骡榨,3D凝膠中的趨化性分析爹舱,或?qū)嶒炇遗囵B(yǎng)器皿的2D涂層)。
材料
膠原蛋白是一種纖維蛋白寻僧,由三條α-鏈組成皿遏,可以組合形成繩狀三螺旋,從而為細胞外基質(zhì)(ECM)提供拉伸強度堪渠。α-鏈含有GXY重復(fù):甘氨酸
是一種適合三螺旋的氨基酸丧忍。通常,X和Y代表羥脯氨酸和脯氨酸陶握,它們是膠原蛋白穩(wěn)定性的關(guān)鍵組分习荚。
I型是最常見的纖維狀膠原蛋白,主要存在于皮膚誓华,骨骼,肌腱和其他結(jié)締組織中胧蹲。由于酸提取和蛋白質(zhì)純化菇唇,這種膠原蛋白被認為不含任何生長因子。
應(yīng)用范圍
在中性pH和37℃下殉酬,I型膠原蛋白將形成3D凝膠匪补,類似于動物細胞外基質(zhì)。3D凝膠可讓您研究ECM的機械性質(zhì)對細胞發(fā)育烂翰,趨化性夯缺,遷移和形態(tài)的影響。與2D系統(tǒng)不同甘耿,3D環(huán)境允許細胞延伸同時在背側(cè)和腹側(cè)細胞表面上利用整合素踊兜。這導(dǎo)致特定信號傳導(dǎo)途徑的激活。凝膠硬度或剛性在3D中比在2D環(huán)境中不同地影響細胞遷移佳恬。此外捏境,由于基質(zhì)原纖維與細胞延伸的纏結(jié)而產(chǎn)生的整聯(lián)蛋白非依賴性機械相互作用在3D系統(tǒng)中是可能的,但在細胞附著于平坦表面的2D系統(tǒng)中是不可能的毁葱。
此外垫言,膠原蛋白I是2D環(huán)境中表面薄涂層的理想選擇。它促進2D培養(yǎng)中眾多細胞類型的細胞粘附倾剿。
2D和3D應(yīng)用都包括腫瘤細胞侵襲筷频,遷移和巨噬細胞和/或單核細胞趨化性的研究。
涂層介紹
確定要涂層的面積或通道的體積前痘。
確定涂層面積A涂層 (即與流體接觸的完整區(qū)域)涯馆。
計算所需的膠原蛋白濃度:
使用,將膠原蛋白稀釋至計算濃度
517.5mM乙酸。膠原蛋白在中性pH下不溶别印。
填充盤子或通道戏筹。
在室溫下孵育一小時。
完全吸入通道或孔體積嫁昌。
用PBS或無血清培養(yǎng)基小心沖洗缓万。
井或渠道現(xiàn)在可以使用了∷裕可選地蔫狰,在室溫下風(fēng)干。
儲存在無菌條件下并盡快使用滴练。
重要信息:
由于膠原分子的剛性和長的三螺旋構(gòu)象芋妻,膠原溶液的粘度極高,超過4mg / ml摊桅,并且在較高濃度下難以處理昭礁。
訂購信息
描述
50201 I型膠原蛋白,大鼠尾巴藻丢,5mg / ml剪撬,1×5ml:非胃蛋白酶原
50202 I型膠原蛋白,大鼠尾巴悠反,5mg / ml残黑,4×5ml:非胃蛋白酶原
50203 I型膠原蛋白,大鼠尾巴斋否,5mg / ml梨水,1×100ml:非胃蛋白酶原
50204 I型膠原蛋白,大鼠尾巴茵臭,10mg / ml疫诽,1×5ml:非胃蛋白酶原
50205 膠原蛋白I型,鼠尾旦委,10mg / ml踊沸,4×5ml:非胃蛋白酶原
50206 I型膠原蛋白,大鼠尾巴社证,10mg / ml逼龟,1×100ml:非胃蛋白酶原